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純水中內(nèi)毒素的檢測及去除方法
更新時(shí)間:2024-01-22 點(diǎn)擊次數(shù):3358

一.熱原的性質(zhì)及除去熱原的方法
1.高溫法
  熱原的耐熱性能良好,60℃加熱1h不被分解破壞,100℃不降解,但180℃3~4h、200℃60min或250℃30~45min可使熱原徹底破壞。因此耐熱物品如玻璃制品、金屬制品、生產(chǎn)過程中所用的容器和其它用具以及注射時(shí)使用的注射器等,均可采用此法破壞熱原。但在通常使用的注射劑熱壓滅菌條件下不足以破壞熱原。
2.吸附法
  熱原在水溶液中可被活性炭、石棉、白陶土等吸附而除去。由于活性炭性質(zhì)穩(wěn)定、吸附性強(qiáng)兼具助濾和脫色作用,故廣泛用于注射劑生產(chǎn),但應(yīng)注意吸附藥液所造成的主藥的損失。
3.超濾法
  熱原分子量為1×106左右,體積較小,約1~5nm ,可以通過一般濾器和微孔濾膜,但采用超濾法如用3.0~15nm 超濾膜可將其除去。
4.蒸餾法
  熱原能溶于水但不揮發(fā),但可隨水蒸氣的霧滴進(jìn)入注射用水中,因此制備注射用水時(shí),原水中的熱原可經(jīng)蒸餾除去,但需多次蒸餾,并加有隔沫裝置,單次蒸餾往往效果不理想。
5.酸堿法
  熱原能被強(qiáng)酸、強(qiáng)堿、強(qiáng)氧化劑破壞。玻璃容器及用具如配液用玻璃器皿、輸液瓶等可用重鉻酸鉀硫酸清潔液或稀氫氧化鈉處理,破壞熱原。
6.其它
  包括離子交換法、凝膠濾過法、反滲透法等。
二.熱原的檢查方法
  《中國藥典》2005年版規(guī)定熱原檢查采用家兔法,細(xì)菌內(nèi)毒素檢查采用鱟試劑法。
1.熱原檢查法
  由于家兔對熱原的反應(yīng)與人基本相似,目前家兔法仍為各國藥典規(guī)定的檢查熱原的法定方法。
  《中國藥典》2005 年版規(guī)定的熱原檢查法系將一定劑量的供試品,靜脈注入家兔體內(nèi),在規(guī)定時(shí)間內(nèi),觀察家兔體溫升高的情況,以判定供試品中所含熱原的限度是否符合規(guī)定。檢查結(jié)果的準(zhǔn)確性和一致性取決于試驗(yàn)動物的狀況、試驗(yàn)室條件和操作的規(guī)范性。家兔法檢測內(nèi)毒素的靈敏度為 0 .001μg/ml,試驗(yàn)結(jié)果接近人體真實(shí)情況,但操作繁瑣費(fèi)時(shí),不能用于注射劑生產(chǎn)過程中的質(zhì)量監(jiān)控,且不適用于放射性藥物、腫瘤抑制劑等細(xì)胞毒性藥物制劑。
2.細(xì)菌內(nèi)毒素檢查法
  細(xì)菌內(nèi)毒素檢查法系利用鱟試劑來檢測或量化由革蘭陰性菌產(chǎn)生的細(xì)菌內(nèi)毒素,以判斷供試品中細(xì)菌內(nèi)毒素的限量是否符合規(guī)定的一種方法。細(xì)菌內(nèi)毒素的量用內(nèi)毒素 單位(EU)表示。細(xì)菌內(nèi)毒素檢查包括凝膠法和光度測定法兩種方法,前者利用鱟試劑與細(xì)菌內(nèi)毒素產(chǎn)生凝集反應(yīng)的原理來檢測或半定量內(nèi)毒素,后者包括濁度法和顯色基質(zhì)法,系分別利用鱟試劑與內(nèi)毒素反應(yīng)過程中的濁度變化及產(chǎn)生的凝固酶使特定底物釋放出呈色團(tuán)的多少來測定內(nèi)毒素。鱟試劑法檢查內(nèi)毒素的靈敏度為 0 .0001μg/ml, 比家兔法靈敏10倍,操作簡單易行,試驗(yàn)費(fèi)用低,結(jié)果迅速可靠,適用于注射劑生產(chǎn)過程中的熱原控制和家兔法不能檢測的某些細(xì)胞毒性藥物制劑,但其對革蘭陰性菌以外的內(nèi)毒素不靈敏目前尚不能完全代替家兔法。

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